结核分枝杆菌复合群核酸检测试剂盒（荧光PCR法）

【检验原理】

本产品采用荧光PCR技术，选取结核分枝杆菌基因组中相对保守的区域，设计特异性引物及探针，在样本核酸提取之后采用荧光PCR方法，对临床样本中结核分支杆菌进行快速定性检测。

本产品采用裂解法提取结核分枝杆菌DNA模板，然后在Taq酶的作用下对靶区域进行扩增，同时利用Taqman荧光探针技术实时监测扩增产物的累积。同时本产品采用内标质控体系，用于监测反应体系可能存在的抑制因素。内标模板与靶基因无同源性，内标探针选择的是与靶基因探针没有冲突的另一检测通道。

【预期用途】

本试剂盒用于定性检测人痰液样本中的结核分枝杆菌复合群核酸。

结核分枝杆菌复合群（M.tuberculosis-complex，MTC）共有五个成员：人型结核分枝杆菌、牛型结核分枝杆菌、非洲分枝杆菌、田鼠分枝杆菌和卡介苗（BCG，减毒牛分枝杆菌）。前三种为结核病的常见病原菌，可通过呼吸道、消化道和破损的皮肤粘膜进入机体，侵犯多种组织器官，引起相应器官的结核病，以肺结核最常见。其致病作用可能是细菌在组织细胞内顽强增殖引起炎症反应，以及诱导机体产生迟发型变态反应性损伤有关。靶基因序列是结核分枝杆菌复合群中的H37Rv基因的一段插入序列。该插入序列含有1361bp的核苷酸和28bp的反向末端重复序列，属于插入序列IS3家族,并且只存在于结核分支杆菌复合群中，非结核分支杆菌中并不存在。插入序列的拷贝数约有10-25个,PCR敏感性较高，所以选择该序列作为扩增靶序列。选取该插入序列90bp的序列，按照荧光PCR引物探针设计原则设计引物探针。本试剂盒对具有结核病相关体征/症状和X线检查结果的疑似结核病患者痰液中结核分枝杆菌复合群（MTC）的特异性DNA核酸片段进行定性检测，可用于临床对结核分枝杆菌感染的辅助诊断。实验操作人员应接受过基因扩增或分子生物学方法检测的专业培训，具备相关的实验操作资格，实验室应具备相关的生物安全防备设施及防护程序。

【产品性能】

【产品特点】

●特异性的PCR扩增反应体系，试剂准确率高；

● 灵敏度高、快速准确、重复性好；

● 高效内标技术避免假阴性。